SPR分子互作分析技術(shù)是近年來在生物分子相互作用研究領(lǐng)域備受矚目的方法,為科學(xué)家深入探究分子間復(fù)雜的相互作用提供了有力的工具。 一、??原理??
SPR技術(shù)的核心是基于金屬膜表面的等離子體共振現(xiàn)象。當(dāng)光線以特定角度照射到金屬膜表面時(shí),金屬中的自由電子會(huì)與入射光相互作用,發(fā)生共振,導(dǎo)致反射光強(qiáng)度在特定角度下出現(xiàn)急劇下降,形成共振峰。當(dāng)生物分子等配體結(jié)合到金屬膜表面的配體上時(shí),會(huì)引起金屬膜表面折射率的改變,進(jìn)而導(dǎo)致共振角發(fā)生移動(dòng),通過監(jiān)測(cè)這種共振角的變化,就能實(shí)時(shí)、定量地檢測(cè)分子間的相互作用過程和結(jié)合情況。
??二、方法??
在實(shí)際應(yīng)用中,通常在一根金膜涂覆的傳感器芯片表面固定一種生物分子作為配體。含有另一種目標(biāo)生物分子的待測(cè)樣品則流經(jīng)傳感器芯片表面。儀器通過精確測(cè)量共振角的變化,并將其轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的結(jié)合和解離信號(hào),進(jìn)而得出分子相互作用的動(dòng)力學(xué)參數(shù)。
??三、優(yōu)勢(shì)??
SPR分子互作分析方法具有諸多優(yōu)勢(shì)。
1、靈敏度較高,能夠檢測(cè)到極低濃度的生物分子相互作用,即使是納摩爾甚至皮摩爾級(jí)別的相互作用也能被準(zhǔn)確捕捉。
2、它是實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)技術(shù),無需對(duì)分子進(jìn)行標(biāo)記,避免了標(biāo)記過程可能對(duì)分子活性和相互作用產(chǎn)生的影響,能夠真實(shí)地反映生物分子之間的自然相互作用狀態(tài)。
3、可以提供動(dòng)力學(xué)信息,不僅能告訴我們分子是否結(jié)合,還能深入了解它們結(jié)合和解離的速度以及相互作用的強(qiáng)度,為研究分子間相互作用的機(jī)制提供重要依據(jù)。
SPR分子互作分析技術(shù)憑借其原理、科學(xué)的分析方法以及明顯的優(yōu)勢(shì),在生物醫(yī)學(xué)、藥物研發(fā)等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。